HMy2.CIR人B淋巴母细胞供应生长情况以及说明书

细胞名称 人B淋巴母细胞

细胞别称 HMy2.CIR; Hmy.2 CIR; HMy2.CIR; C1R

细胞货号 SNL-011

细胞种属 人

生长情况 悬浮

培养条件 IMDM+10%FBS+1%双抗

培养环境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、细胞培养操作

换液周期 2-3天

培养基体积 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

传代比例 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法 1. 混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；

2. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；

3. 补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

注意事项 部分悬浮细胞会附着瓶底，轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);

冻存规格 200-300万/ml，1ml每管

冻存方法 1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；

2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；

3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存

注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活xing，若有异常，及时调整实验方案

Tips：

1. 细胞悬浮生长，形态各异，偶有小聚团，部分细胞附着瓶底；

2. 圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞，如果无法判断，可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率；

3. 悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间，密度过低或者过高可能会影响细胞状态；