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BHK-21仓鼠肾成纤维细胞实验级供应
BHK-21仓鼠肾成纤维细胞实验级供应
一、细胞基本属xing
细胞别称 仓鼠肾成纤维细胞
细胞别称 BHK-21
细胞货号 SNL-008
细胞种属 仓鼠
生长情况 贴壁
培养条件 EMEM(MEM+NEAA)+10%FBS+1%双抗
培养环境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);
冻存规格 200-300万/ml，1ml每管
冻存方法 1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存
3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活xing，若有异常，及时调整实验方案
Tips：
1.细胞细长梭形生长，贴壁较弱，消化时间较短，注意控制消化时间；
2.注意控制传代密度，密度过低时会生长缓慢；
1. 所有细胞免费售后期为一周，一周内细胞培养出现异常及时拍照反馈。超出一周没有任何反馈视为细胞培养正常，后期若出现培养问题不再免费重发。
2. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息，若无清晰照片及相应信息，不予免费售后；若文件较多不方便在线联系或传送，可以向销售索要细胞情况表，填写后反馈给销售。
3. 售后仅针对由于细胞自身状态问题导致不可传代的情况，若客户收货一周内已经传代或转移细胞多次，出现死亡或者污染时不予免费售后；若客户在我方未允许的情况下，擅自遗弃细胞，视为客户自身问题导致细胞异常，不予免费售后。
4. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同，导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异，对于此类细胞适应环境生长的行为，不予过度解释或免费售后。
5. 冻存细胞发货2管，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户未反馈并复苏2管失败，我方将不提供免费售后服务。冻存细胞售后均发复苏培养的，若要重发冻存细胞，需补加干冰运输费用。
6. 客户自行冻存细胞一定要注意冻存后复苏一管检查冻存活xing，避免冻存死亡导致绝种。我方不对客户冻存细胞死亡负责，客户冻存细胞死亡时不予免费售后。
7. 细胞收货后，请收集发货培养基培养至少一瓶细胞，用于确定细胞培养条件及实验操作是否合适。